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不同類型浮游生物的樣本處理和保存方法有何不同?

更新時(shí)間:2025-03-11      瀏覽次數(shù):453
  不同類型的浮游生物樣本處理和保存方法存在一定差異,以下是一些常見的情況:
  
  一、浮游植物
  
  1、樣本處理
  
 ?。?)采集:
  
  浮游植物采樣通常使用浮游生物網(wǎng),根據(jù)水體深度和研究目的選擇合適的網(wǎng)孔大小。對(duì)于小型浮游植物,一般采用20-25μm的網(wǎng)孔;對(duì)于較大體型的藻類等,可使用稍大網(wǎng)孔的網(wǎng),如75μm等。
  
  從表層到深層緩慢拖網(wǎng),以獲取不同水層的浮游植物樣本。拖網(wǎng)速度要均勻,避免對(duì)浮游植物造成過大的破壞。
  
 ?。?)固定:
  
  常見的固定方法是使用魯哥氏液(Lugol'ssolution)。它由碘、碘化鉀和蒸餾水配制而成。一般每1000ml水樣中加入15-20ml魯哥氏液。魯哥氏液可以使浮游植物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固,保持細(xì)胞形態(tài),并且具有一定的染色作用,方便在顯微鏡下觀察。
  
  對(duì)于一些需要長(zhǎng)期保存或者對(duì)固定劑比較敏感的浮游植物,也可以考慮使用甲醛-丙三醇混合固定劑。這種固定劑能夠更好地保存細(xì)胞的精細(xì)結(jié)構(gòu),甲醛的最終濃度一般在2%-4%,丙三醇濃度在10%-20%。
  
  2、樣本保存
  
 ?。?)短期保存(幾天到幾周):
  
  將固定好的樣本放在避光、低溫(4-10℃)的環(huán)境下保存??梢允褂美洳叵浠蛘弑涞睦洳厥摇_@樣的條件可以減緩浮游植物細(xì)胞的新陳代謝,防止其繼續(xù)生長(zhǎng)或死亡過快,從而保證樣本的代表性。
  
 ?。?)長(zhǎng)期保存(幾個(gè)月到幾年):
  
  經(jīng)過魯哥氏液固定的浮游植物樣本可以保存在棕色試劑瓶中,置于陰涼處。如果是使用甲醛-丙三醇混合固定劑固定的樣本,也可以采用類似的方式保存,但要避免陽光直射,因?yàn)楣庹湛赡軙?huì)引起化學(xué)反應(yīng),影響固定效果。
  

浮游生物

 

  二、浮游動(dòng)物
  
  1、樣本處理
  
  (1)采集:
  
  浮游動(dòng)物采樣同樣使用浮游生物網(wǎng),但網(wǎng)孔大小要根據(jù)目標(biāo)浮游動(dòng)物的大小來選擇。例如,對(duì)于小型輪蟲、枝角類等,可使用30-50μm的網(wǎng)孔;對(duì)于較大的橈足類等,可能需要100-200μm甚至更大的網(wǎng)孔。
  
  采集過程中要注意避免對(duì)浮游動(dòng)物造成機(jī)械損傷,盡量輕柔地操作采樣設(shè)備。有些浮游動(dòng)物具有趨光性或避光性,可能需要在不同光照條件下進(jìn)行分層采樣。
  
 ?。?)麻醉與固定:
  
  對(duì)于一些活動(dòng)能力較強(qiáng)的浮游動(dòng)物,如橈足類,可以先使用低濃度的麻醉劑(如硫酸鎂溶液,濃度約為1%-2%)進(jìn)行處理,使其暫時(shí)失去活動(dòng)能力,便于后續(xù)操作。麻醉時(shí)間一般為10-15分鐘。
  
  固定浮游動(dòng)物常用的固定劑是福爾馬林(甲醛溶液),最終濃度一般在2%-4%。福爾馬林可以使浮游動(dòng)物的蛋白質(zhì)變性,起到固定形態(tài)的作用。但福爾馬林對(duì)細(xì)胞的核酸等成分有一定的破壞作用,所以如果后續(xù)需要進(jìn)行分子生物學(xué)相關(guān)的研究,可能需要采用其他更合適的固定方法,如使用乙醇或丙酮等有機(jī)溶劑固定。
  
  2、樣本保存
  
 ?。?)短期保存(幾天到幾周):
  
  將固定后的浮游動(dòng)物樣本放在4-10℃的冰箱中冷藏保存。在這個(gè)溫度范圍內(nèi),浮游動(dòng)物的形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)能夠保持相對(duì)穩(wěn)定,有利于后續(xù)的形態(tài)學(xué)觀察和分類研究。
  
 ?。?)長(zhǎng)期保存(幾個(gè)月到幾年):
  
  可以使用冷凍保存的方法。將經(jīng)過適當(dāng)處理(如用抗凍劑預(yù)處理)的浮游動(dòng)物樣本放入低溫冰箱(-20℃以下)或液氮罐中保存。冷凍保存可以有效地抑制微生物的生長(zhǎng)和酶的活性,從而長(zhǎng)時(shí)間地保存浮游動(dòng)物樣本。不過,冷凍過程可能會(huì)對(duì)浮游動(dòng)物的細(xì)胞造成一定的損傷,所以在解凍后用于某些研究時(shí)(如細(xì)胞培養(yǎng)),可能需要進(jìn)一步評(píng)估樣本的活力和完整性。
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